Hybridoma Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 תיאור המוצר

产品名称

שם המוצר

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Cat.No

BRS-MED01

规格

מִפרָט

500 מ"ל/瓶

500 מ"ל לבקבוק

产品组分

רכיבים

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

בינוני בסיס DMEM: 80% (V/V)

进口胎牛血清:10%(体积比)

סרום בקר עוברי מיובא (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

מותנה בינוני: 10% (V/V)

青霉素:100 单位/mL

פניצילין: 100 U/mL

链霉素:100 单位/מ"ל

סטרפטומיצין: 100 U/mL

次黄嘌呤(היפוקסנטין):100uM

היפוקסנטין: 100 מיקרומטר

胸腺嘧啶核苷(תימידין):16uM

תימידין: 16 מיקרומטר

氨基蝶呤(אמינופטרין):0.4uM

אמינופטרין: 0.4 מיקרומטר

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

תוספים נוספים: ציטוקינים שונים (כמות מספקת) ותוספי מזון

保存条件

תנאי אחסון

-20 מעלות 保存, 有效期 18 个月.

אחסן ב-20 מעלות. חיי מדף: 18 חודשים.

使用方法

הוראות שימוש

培养基融化:

37 מעלות 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 דקות使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

הפשרת המדיום:

מפשירים את המדיום באמבט מים של 37 מעלות. נגב את המשטח החיצוני עם 70% אתנול והנח אותו בארון בטיחות ביולוגי לשימוש.
הערה: המראה של כמות קטנה של חומר צמריר לבן לאחר הפשרה הוא נורמלי. הניחו למדיום לעמוד 3-5 דקות כדי שהפלקים ישקעו בתחתית, ואז אספו בזהירות את הסופרנטנט לשימוש.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推铔 :9 37 מעלות 5% CO2 培养箱静置培养.

היתוך תאים וזריעה:

בצע היתוך תאים בשיטות פיזיקליות (אלקטרופיוזיציה) או כימיות (PEG קונבנציונליות). השהה מחדש את התאים המאוחדים ישירות בתווך זה בצפיפות ובנפח מתאימים:

אלקטרופוזיה: 1 × 10⁴ - 2 × 10⁴ תאים/באר

היתוך PEG: 5 × 10⁴ - 1 × 10⁵ תאים/באר
נפח מומלץ: 200 μL/באר בצלחת עם 96 בארים.
דגירה ב-37 מעלות, 5% CO₂ לתרבית.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

החלפה בינונית:

בימים 4-8 לאחר ה-היתוך, בצע החלפת מדיום חלקית או מלאה בהתאם למצב הגדילה של התאים.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

הקרנת שיבוט:

כאשר שיבוטי התאים בבארות מגיעים לגודל מתאים, בצע סקר שיבוט חיובי.

注意事项

אמצעי זהירות

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

מוצר זה רעיל ומיועד רק לבחירה והתרבות של תאי היברידומה. אסור להשתמש בו לתרבית של בעלי חיים חיים, למטרות אבחון או ליישומים טיפוליים.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1牉, SP2/0).

מוצר זה מתאים לבחירה והתרבות של תאי היברידומה באמצעות מערכת הבחירה HGPRT. זה לא ישים עבור TK או מערכות בחירה אחרות. לא ניתן להשתמש במדיום זה להתרבות ישירה של תאים חסרי HGPRT- (למשל, NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7.2~7.4,取用需在无菌条件下进行.

מוצר זה הוא תמיסה סטרילית עם pH של 7.2-7.4. כל טיפול חייב להתבצע בתנאים אספטיים.