ביוטין פפטידים

מהם פפטידים ביוטינילטים?

פפטידים ביוטין הם פפטידים שעברו שינוי לכלול חלק ביוטין. שינוי זה מנצל את האינטראקציה הגבוהה-בזיקה בין ביוטין לאבידין או סטרפטאבידין, שנמצא בשימוש נרחב ביישומים ביולוגיים וביוכימיים. מולקולת הביוטין קטנה, יציבה ואינה משנה באופן משמעותי את המבנה או התפקוד של הפפטיד, תוך שהיא מאפשרת לכידה או זיהוי יעילים ביותר באמצעות מערכות מבוססות אבידין-.

 

שינוי כימי
ביוטין מוכנס בדרך כלל דרך ריאגנט NHS -ביוטין (N-hydroxysuccinimide biotin), המגיב עם קבוצות אמינים ראשוניות שנמצאות בקצה ה-N- של הפפטיד או בשאריות ליזין, ויוצרות קשר אמיד יציב.

生物素（ביוטין）肽（פפטיד）

COOH NH₂

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（הפעלה） → 缩合（צימוד）

↓ ↓

ביוטין-CONH-פפטיד

 

אינטראקציית זיקה
הפפטיד הביוטיניל יכול להיקשר חזק (Kd ~10⁻¹⁵ M) לאווידין או סטרפטאווידין, מה שהופך אותו לאידיאלי לשימוש במבחנים הדורשים זיהוי מדויק, לכידה או אימוביליזציה.

מקרים של סינתזת פפטיד ביוטיניל

רצף פפטיד: ביוטין-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

אורך: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

רצף פפטיד: ביוטין-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

אורך: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

יישומים של פפטיד ביוטיניל

פפטידים ביוטינילטים הם כלים מגוונים במחקר ובתעשייה, עם מגוון רחב של יישומים, כולל:

טיהור זיקה

משמש לטיהור שותפים מחייבים כגון חלבונים, נוגדנים או חומצות גרעין על ידי השבתת הפפטיד הביוטיניל על חרוזי סטרפטווידין.

ELISA ו-Western Blotting

פפטידים בעלי ביוטיניל פועלים כבדיקות לאיתור אינטראקציות ספציפיות כאשר הם משולבים עם תוויות פלורסנט של אבידין-HRP או אבידין-.

תהודה פלסמון משטח (SPR)

משמש לשיקום פפטידים על שבבי חיישן ביולוגי למחקרי אינטראקציה.

גילוי סמים

סקר מועמדים לתרופות על ידי ניתוח הקישור שלהם למטרות פפטיד ביוטיניל.

תוֹרַת הַחִסוּן

פפטידים בעלי ביוטיניל משמשים למיפוי אפיטופים, מחקר אינטראקציות של נוגדנים-אנטיגן וביצוע מבחני תאי T-.

מיפוי אפיטופים לפיתוח חיסונים

פפטיד ביוטיניל מותאם אישית שימש לזיהוי אפיטופים אנטיגנים של חלבון ויראלי, וסייע בעיצוב מועמד לחיסון.

מחקרי אינטראקציה של חלבונים-

פפטידים בעלי ביוטיניל שהוקמו על גבי לוחות מצופות סטרפטאווידין- אפשרו מחקר של אינטראקציות עם ליגנד קולטנים, וחשפו זיקות קישור קריטיות לפיתוח תרופות.

אופטימיזציה של בדיקות אימונו

במבחן אבחון, פפטידים ביו-טינילטים הופעלו כאנטיגנים כדי לשפר את הרגישות והספציפיות של ה-ELISA לזיהוי סמנים ביולוגיים של מחלה.

 

הפניות

1. גרין, NM (1975).אבידין וסטרפטווידין.יומן ביוכימי, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L., & Wolf, FJ (1964).התכונות של streptavidin, חלבון קושר ביוטין- המיוצר על ידי Streptomyces.ארכיון ביוכימיה וביופיזיקה, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, & Titus, G. (1994).ביוטינילציה של חלבונים במחקר וביוטכנולוגיה.Anal Biochem, 218(1), 1-7.